簡要描述:OP9小鼠骨髓基質細胞,小鼠細胞系原代凍存或復蘇培養(yǎng),復蘇時間1-2周,保證細胞純度在98%以上,同時也需經(jīng)過微生物檢測,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌.
詳細介紹
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OP9小鼠骨髓基質細胞,小鼠細胞系介紹:
小鼠骨髓基質細胞來源于ATCC原代細胞,ATCC傳代細胞,sciencell細胞
原代凍存或復蘇培養(yǎng),復蘇時間1-2周,保證細胞純度在98%以上,同時也需經(jīng)過微生物檢測,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌.
細胞名稱 : 小鼠骨髓基質細胞
簡稱:OP9
培養(yǎng)條件:MEMα(不含核苷和脫氧heg)+20% FBS
形 態(tài):貼壁;成纖維細胞樣
背 景:OP9細胞株源自新生的op/op 小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個突變,它不能生成有功能的巨噬細胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對胚胎干細胞(ES)分化成血細胞而不是其他巨噬細胞有抑制功能。 OP9細胞可以用于與小鼠胚胎干細胞共培養(yǎng)以誘導胚胎干細胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細胞譜系的血細胞。與OP9共培養(yǎng)不需要外源的生長因子或復雜的胚胎結構。這個系統(tǒng)對研究造血細胞的發(fā)育和分化的分子機理有用。
細胞數(shù): 1×106cells
規(guī)格: 1ml/T25
運輸保存:采用干冰保存運輸
細胞用途:僅供科研使用
小鼠骨髓基質細胞培養(yǎng)操作規(guī)程僅供參考
準備好培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件及凍存液。
細胞處理
復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,*的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。
小鼠骨髓基質細胞購買細胞注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件.
6. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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